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液質聯用儀的驗收標準
發表時間:2018/6/26 15:59:05  |  點擊率:634

液質聯用儀標準判斷

一,靈敏度,必須在單位質量分辨率下

靈敏度是用信噪比來表示的,S/N,信噪比的計算又有峰-峰比和RMS之分(RMS計算的信噪比一般要比峰-峰比計算的高5~10倍)

 RMS是在待測峰周圍,找一段質量範圍,然後做均方根平均,作為噪音高度(強度)。再拿待測峰的高度除以平均高度,即為RMS。

峰比,是尋找待測峰周圍一個最高的噪音峰,拿待測峰的高度去比上最強的那個噪音峰。可能藥物殘留檢測時要求如何判定時會用到。儀器驗收時,不會做這事,因為即使做,也是一針好一針壞,每個實驗室的結果都不一樣。

質譜的一大特色,就是它是一個質量檢測器,峰麵積跟質量成正比。也就是說,拿1 pg/uL,進樣10 uL;跟拿5 pg/uL,進樣2 uL相比,如果其它條件都一樣,峰麵積應該是一樣的。

從實驗人員來說,稀釋樣品可能比較容易,很容易比較準確;而進樣器的定量環一般為20 uL,所以進樣10 uL,一定比進樣2 uL來得準確一些。

 

 

二,分辨率,必須指明在哪個具體的質量處

1)對於磁質譜,我們如果說分辨率為10000,比常規有機質譜10000的分辨率,要好很多很多。

2)對於四極杆、離子阱,分辨率用10000表示是不科學的,因為它總在變,所以用FWHM或R=nM表示比較好,因為它在基本m/z範圍內是不變的。或者,說明是在哪個質量數下測定的,比如在500 m/z時,分辨率優於5000。

3)對於TOF/FT/Orbitrap等,必須指明在哪個質量數下麵測定的,也用10000、20000 之類的數字來表示。

 

 

三,單位質量分辨下的m/z範圍

必須是單位質量分辨以內的m/z範圍

1、四極杆型

 最高的極限大約在3000~4000 amu

 那麽,四極杆最擅長的就是定量!

 2、離子阱型

 最高的極限大約在4000(單位質量分辨下),

離子阱普遍對小質量有歧視(1/3效應),但對大質量(比如1000 amu以上的)反而比四極杆的響應好。

 3,飛行時間TOF

單獨的TOF做個十幾萬沒什麽問題,但在串聯了前端的四極杆、離子阱後,二級質譜(MS/MS)的m/z範圍就會受到四極杆、離子阱的限製。

單從液質聯用來說,能做串聯質譜是非常重要的,因為液質的背景幹擾比氣質大得多,串聯質譜就是要去除背景。作為前端的質量選擇器,大部分都采用四極杆或者離子阱。

四,談掃描速度

首先必須聲明,掃描速度不是非常重要的一個指標。因為實際獲得一種譜圖,我們考慮的是duty cycle的時間,也就是采集一張譜圖需要多少時間。所以,考察儀器“快”、“慢” 的主要衡量標準,應該是duty cycle時間,而不是掃描速度。

掃描速度指的是:把規定m/z範圍內的離子一個一個“掃描”出質量分析器的能力,表示為:amu/sec。這僅僅指從分析器出來的一段時間,質量分析器不同、工作模式不同,差別就很大。

1、四極杆:

duty cycle時間=掃描時間+掃描之間的間隔時間

對於全掃描,比如 掃描m/z 50~550 amu,掃描速度1000 amu/sec,可知道掃描時間為:500/1000=0.5秒=500 毫秒,間隔時間為幾個毫秒,所以,大約每秒可以采集2張全掃描譜圖。

對於SIM,比如掃描 m/z 499.5~500.5 amu,掃描速度1000 amu/sec,可知道掃描時間為:1/1000=0.001秒。間隔時間就比較重要了,為幾個毫秒,所以,用SIM,每秒可采集幾百張譜圖

 2、TOF

 TOF是最快的質量分析器,如果隻求快,不要求分辨率,可以快到每秒采集幾萬張全掃描譜圖。

 如果還要求高分辨率,可以每秒采集1~20張全掃描譜圖。

液質聯用儀,質譜色譜聯用,可以獲得豐富的信息量,提高工作的效率,比如以前兩次甚至三次實驗做的事,現在一次實驗就搞定。

 

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